雌二醇Elisa試劑盒的樣本處理要求

　　雌二醇Elisa試劑盒是一種基於(yu) 競爭(zheng) 法原理的固相酶免吸附實驗（ELISA）。反應板上的微檢測孔包被有能結合雌二醇分子上獨特抗原位點的單克隆抗體(ti) 。一份含有內(nei) 源性雌二醇的病人樣本與(yu) 辣根過氧酶標記的雌二醇競爭(zheng) 性的結合包被板上的抗體(ti) 。溫育之後，未結合的酶聯物用洗滌液洗去。過氧酶與(yu) 包被抗體(ti) 的結合量與(yu) 樣品中雌二醇的濃度成反比。加入底物液後，所顯示的顏色強度與(yu) 病人樣品中雌二醇的濃度成反比。

　　雌二醇Elisa試劑盒樣本處理及要求：

　　1.血清：將收集於(yu) 血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然後1000×g離心20分鍾，取上清即可，或將上清置於(yu) -20℃或-80℃保存，但應避免反複凍融。

　　2.血漿：用EDTA或肝素作為(wei) 抗凝劑采集標本，並將標本在采集後的30分鍾內(nei) 於(yu) 2-8℃1000×g離心15分鍾，取上清即可檢測，或將上清置於(yu) -20℃或-80℃保存，但應避免反複凍融。

　　3.組織勻漿：用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)衝(chong) 洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會(hui) 影響測量結果），稱重後將組織剪碎。將剪碎的組織與(yu) 對應體(ti) 積的PBS（一般按1:9的重量體(ti) 積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體(ti) 體(ti) 積可根據實驗需要適當調整，並做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑製劑）加入玻璃勻漿器中，於(yu) 冰上充分研磨。為(wei) 了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反複凍融。後將勻漿液於(yu) 5000×g離心5~10分鍾，取上清檢測。

　　雌二醇Elisa試劑盒的結果計算：

　　1.計算每個(ge) 標準品、質控品和病人樣本的平均吸光度值。

　　2.用吸光度值作為(wei) 縱坐標（y），濃度值作為(wei) 橫坐標（x），以每個(ge) 標準品的吸光度值對其相應的濃度值進行標繪，作一標準曲線。

　　3.用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應的濃度。

　　4.自動計算方法：在IFU上，它用四參數曲線已自動計算出結果。其它的歸納方法可能會(hui) 得出稍微不同的結果。

　　5.樣品的濃度可直接從(cong) 標準曲線上讀取。樣品中HPL濃度高於(yu) 高標準品的必須用進行進一步的稀釋。在計算樣品濃度時就應當把此稀釋因子考慮進去。