降鈣素hth体育下载地址操作時有哪些步驟是值得注意的？

　　降鈣素hth体育下载地址采用雙抗體(ti) 夾心法酶聯免疫吸附檢測技術，測定樣品中人降鈣素原水平，向預先包被了抗人降鈣素原抗體(ti) 的酶標孔中，加入標準品和樣本，溫育後，加入標記的抗降鈣素原抗體(ti) ，再與(yu) HRP標記的鏈黴親(qin) 和素結合，形成免疫複合物，再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶，然後加入顯色底物TMB，產(chan) 生藍色，並在酸的作用下轉化成黃色，在450nm處測定反應孔樣品吸光度值，樣本中的人降鈣素原濃度與(yu) OD值成正比，通過繪製標準曲線計算出樣本中人降鈣素原的濃度。

　　降鈣素hth体育下载地址操作步驟：

　　1、加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100，餘(yu) 孔分別加標準品或待測樣品100，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加於(yu) 酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37溫育2小時。為(wei) 保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

　　2、棄去液體(ti) ，甩幹，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液100（臨(lin) 用前配製），酶標板加上覆膜，37溫育1小時。

　　3、棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板3次，每次浸泡1-2分鍾，大約400/每孔，甩幹（也可輕拍將孔內(nei) 液體(ti) 拍幹）。

　　4、每孔加檢測溶液B工作液（臨(lin) 用前配製）100，加上覆膜，37溫育1小時。

　　5、棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板5次，方法同步驟3。

　　6、每孔加底物溶液90，酶標板加上覆膜37避光顯色（反應時間控製在15-30分鍾，當標準孔的前3-4孔有明顯的梯度藍色，後3-4孔梯度不明顯時，即可終止）。

　　7、每孔加終止溶液50，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與(yu) 底物液的加入順序相同。

　　8、立即用酶標儀(yi) 在450nm波長測量各孔的光密度（值）。

　　降鈣素hth体育下载地址在人體(ti) 內(nei) ，主要由甲狀腺的濾泡旁細胞(也稱為(wei) C細胞)產(chan) 生，在其他動物中，由末咽體(ti) 產(chan) 生，它的作用是降低血鈣(Ca2+)，抵抗甲狀旁腺激素(PTH)，在魚類、爬行動物、鳥類和哺乳動物中發現了降鈣素。