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兔hth体育下载地址的計算方式和正確操作步驟

發布時間:2022-11-15      點擊次數:676
  兔hth体育下载地址計算以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
  兔hth体育下载地址操作步驟:
  1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
  2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做複孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用複孔的盡量做複孔。標本用標本稀釋液:稀釋後加入50ul於反應孔內。
  3.加入稀釋好後的標準品50ul於反應孔、加入待測樣品50ul於反應孔內。立即加入50ul的標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育小時。
  4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
  5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鍾。
  6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
  7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育0分鍾。避免光照。
  8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液後應立即測定結果。
  9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
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