熒光探針pcr試劑盒利用吸附柱提取RNA作為模板,在反轉錄酶的作用下,以引物為起點合成與RNA模板互補的cDNA鏈;然後在DNA聚合酶的作用下,經高溫變性、低溫退火和中溫延伸的多次循環,使特異DNA片段的拷貝數放大數百萬倍。將擴增的DNA片段進行電泳、染色後,在紫外燈下,肉眼可見DNA片段的擴增帶。
熒光探針pcr試劑盒儲存條件:
1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液後,3000轉離心10分鍾將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鍾取上清。
3.細胞上清液:3000轉離心10分鍾去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鍾取上清。
5.保存:如果樣本收集後不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存於-20℃,避免反複凍融,在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍。
熒光探針pcr試劑盒的注意事項:
1.加入試劑的順序應,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
2.使用幹淨的塑料容器配置洗滌液。
3.按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
4.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露於光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成後應立即讀取OD值。
5.洗滌酶標板時應充分拍幹,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
6.使用一次性的吸頭以免交叉汙染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
7.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
8.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢複到室溫。稀稀過後的標準品應丟棄,不可保存。
9.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。