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谘詢電話:18321818584ELISA結果的鑒定
一,準確性:免疫學專(zhuan) 一性的測定。用免疫擴散、交叉電泳和免疫電泳測定抗原和抗體(ti) 的純度。如果是測定抗原(或半抗原),一般將放射免疫測定法(RIA)的結果作比較;如果是測定抗體(ti) ,一般將免疫熒光法(IFA)的結果比較。用其他實驗所得的數據來核證。例如病毒侵染動、植物機體(ti) 後,會(hui) 出現一係列病理變化,這些病理數據與(yu) 病毒侵染量如存在線性關(guan) 係,那麽(me) 用ELISA測定病毒的量應與(yu) 病理數據的變化相一致。多次實驗,將每次ELISA結果進行比較。
二,精確度:將同一樣品進行一係列不同濃度的測定,得到濃度範圍廣泛的一條曲線,選擇該曲線坡度陡、重複性好的區域作為(wei) 測定範圍。對ELISA測定範圍的確定,有益於(yu) 選擇實際使用的合適濃度。
三,靈敏性:ELISA的靈敏性高,它對許多抗原的測定,靈敏度可達1-10ng/ml。作出ELISA某種方法靈敏度高低的結論要慎重,因為(wei) 許多因素會(hui) 影響ELISA的靈敏度,例如抗體(ti) 的效價(jia) 、酶的活性、酶標記抗體(ti) 的質量、反應的時間與(yu) 溫度、載體(ti) 的吸附力、底物的濃度與(yu) pH等。隻有在條件嚴(yan) 格一致的情況下才能作出比較。
計算
以標準物的濃度為(wei) 橫坐標,OD值為(wei) 縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與(yu) OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為(wei) 樣品的實際濃度。
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