濾紙酶可見分光光度法檢測試劑盒實驗方法學

實驗方法學：

一、肝素的配製：產(chan) 品僅(jin) 用於(yu) 科研

市售肝素凍幹粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍幹粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(hui) 凝固。老鼠血易凝固，所以更濃一些。可以取0.1克肝素凍幹粉，加3ml生理鹽水溶解後，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的製備：取0.1克肝素凍幹粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低於(yu) 80℃小烤箱中（可以用烤麵包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鍾轉動一次，直至幹燥後放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩(liang) 種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體(ti) 我們(men) 稱之為(wei) 血清；抗凝分離出的上層黃色的液體(ti) 我們(men) 稱之為(wei) 血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

測定意義(yi) ：

纖維素酶是由微生物產(chan) 生的多組分的酶係，能水解纖維素β-1,4葡萄糖苷鍵生成葡萄糖，濾紙酶是其中的一個(ge) 組分，研究濾紙酶活力對纖維素酶的研究具有非常重要的意義(yi) 。

測定原理

濾紙酶水解濾紙產(chan) 生的還原糖能與(yu) 3,5-二硝基水楊酸生成紅棕色氨基化合物，在540nm處有光吸收，在一定範圍內(nei) 反應液顏色深淺與(yu) 還原糖的量成正比，可測定計算得濾紙酶的活力。

自備實驗用品及儀(yi) 器

天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。。